检测项目
细胞活力检测:
- 细胞存活率:IC50值(参照ISO10993-5)
- 代谢活性:MTT法吸光度值(OD570nm≥0.5)
- 膜完整性:LDH释放率(≤15%)
细胞凋亡检测:- 早期凋亡:AnnexinV阳性率(荧光强度≥200)
- 晚期凋亡:PI染色阳性细胞比例(≤10%)
- Caspase-3活性:酶活单位(U/mg蛋白)
基因表达分析:- 重金属响应基因:MT基因表达倍数(RT-qPCRCt值差)
- 氧化应激基因:SOD表达量(foldchange≥2)
- DNA修复基因:p53表达水平(相对定量)
蛋白质表达检测:- 金属硫蛋白:Westernblot灰度值(密度比≥1.5)
- 热休克蛋白:HSP70表达量(ELISApg/mL)
- 炎症因子:TNF-α浓度(检测限1pg/mL)
重金属积累测定:- 细胞内金属含量:铅积累量(μg/mg蛋白)
- 金属分布:亚细胞定位比率(胞质/核≥3:1)
- 结合形态:游离离子比例(≤20%)
氧化应激指标检测:- 活性氧水平:DCF荧光强度(AU)
- 抗氧化酶活性:SOD活力(U/mg蛋白)
- 脂质过氧化:MDA浓度(nmol/mg蛋白)
DNA损伤测试:- 彗星试验:尾矩值(≥10)
- 微核率:微核细胞比例(≤5‰)
- 8-OHdG含量:HPLC检测值(ng/mL)
细胞周期分析:- 周期阻滞:G1期细胞比例(PI染色)
- S期占比:BrdU掺入率(≤30%)
- 有丝分裂指数:分裂相计数(个/1000细胞)
炎症因子检测:- 细胞因子释放:IL-6浓度(ELISApg/mL)
- 趋化因子:MCP-1表达量(相对倍数)
- NF-κB活性:荧光报告值(AU)
代谢活性检测:- ATP含量:发光值(RLU)
- 糖酵解率:乳酸产量(mmol/L)
- 线粒体功能:JC-1红绿比(≥1.0)
检测范围
1.肝细胞系:HepG2等细胞,重点检测重金属代谢毒性和积累效应,如铅诱导的肝损伤指标
2.神经细胞系:SH-SY5Y等细胞,侧重神经毒性测试,包括汞引起的凋亡和基因表达变化
3.肾细胞系:HK-2等细胞,检测镉导致的肾小管损伤和氧化应激反应
4.肺细胞系:A549等细胞,针对吸入毒性,测试砷引起的炎症因子释放
5.胚胎干细胞:hESC等细胞,聚焦发育毒性预警,如铬诱导的DNA损伤和分化异常
6.免疫细胞:THP-1等细胞,重点检测重金属免疫抑制效应,包括镍相关的细胞因子失衡
7.皮肤细胞系:HaCaT等细胞,侧重皮肤刺激和腐蚀测试,如铜暴露的膜完整性变化
8.生殖细胞:GC-1等细胞,检测生殖毒性,如镉引起的精子活力下降和凋亡
9.癌细胞系:MCF-7等细胞,用于特定毒性研究,包括砷诱导的细胞周期阻滞
10.原代细胞:人肝原代细胞等,更接近生理状态,检测重金属累积和整体毒性响应
检测方法
国际标准:
- ISO10993-5医疗器械生物学评价细胞毒性试验
- OECDTG487体外哺乳动物细胞微核试验
- ASTME2520细胞活力测定标准方法
- ISO21427-1水质DNA损伤检测彗星试验
- OECDTG432体外皮肤腐蚀性测试
国家标准:- GB/T16886.5医疗器械生物学评价细胞毒性试验
- GB/T27819化学品细胞凋亡检测方法
- GB/T35520重金属细胞积累量测定
- GB/T28631细胞氧化应激指标检测
- GB/T30978细胞基因表达分析规范
(方法差异说明:ISO10993-5与GB/T16886.5在培养时间上差异,ISO要求24-72小时而GB为48小时;OECDTG487与GB/T27819在微核计数标准不同,OECD使用双核细胞而GB包括单核细胞;ASTME2520与GB/T35520在重金属预处理上,ASTM规定pH缓冲而GB要求特定离子强度)
检测设备
1.倒置显微镜:型号IX-500(分辨率0.2μm,放大倍数40-400X)
2.流式细胞仪:型号FC-200(检测通道8个,流速12μL/min)
3.原子吸收光谱仪:型号AAS-300(检测限0.1ppb,波长范围190-900nm)
4.实时荧光定量PCR仪:型号qPCR-750(动态范围10^8,温度精度±0.1℃)
5.酶标仪:型号EM-100(波长范围220-1000nm,精度±2%)
6.细胞培养箱:型号CC-150(CO2控制±0.1%,温度范围30-40℃)
7.超低温冰箱:型号UF-86(温度-86℃,容积500L)
8.离心机:型号CR-5000(最大转速15000rpm,容量6×50mL)
9.电泳系统:型号EP-200(电压范围10-300V,凝胶尺寸8×10cm)
10.化学发光成像仪:型号CL-600(灵敏度0.1pg,像素500万)
11.细胞计数仪:型号CC-200(计数精度±5%,样本量20μL)
12.高压灭菌器:型号HA-300(压力0.22MPa,温度121℃)
13.纯水系统:型号PW-100(电阻率18.2MΩ·cm,流量1L/min)
14.恒温水浴锅:型号WB-150(温度范围RT-100℃,精度±0.5℃)
15.生物安全柜:型号BS-200(气流速度0.5m/s,HEPA过滤效率99.99%)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).
CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师.
合作客户(部分)
1、自改制以来和政、企、军多方多次合作,并获得众多好评;
2、始终以"助力科学进步、推动社会发展"作为研究院纲领;
3、坚持科学发展道路,统筹实验建设与技术人才培养共同发展;
4、学习贯彻人大精神,努力发展自身科技实力。