核酸检测

检测项目

核酸提取：

• 浓度测定：检测限≥1ng/μL（参照ISO20391-1）
• 纯度分析：A260/A280比值1.8-2.0（GB/T34796）
• 完整性检测：RNA完整性数≥7.0（RIN标准）

PCR扩增：

• 循环阈值：Ct值≤40（定量标准）
• 扩增效率：90%-110%（斜率-3.3至-3.6）
• 特异性验证：无非特异性扩增（熔解曲线分析）

定量分析：

• 拷贝数定量：检测范围10^2-10^9copies/μL
• 相对表达量：2^−ΔΔCt计算（偏差±1.0）
• 绝对定量：标准曲线R²≥0.98

测序分析：

• 序列覆盖率：≥98%（参照ISO/IEC17025）
• 错误率：≤0.05%（Q30≥80%）
• 读长分布：平均读长≥150bp

病原体检测：

• 检测限：LOD≤10copies/mL（ISO15189）
• 特异性：无假阳性（交叉验证）
• 灵敏度：≥95%（阳性对照）

基因分型：

• 等位基因频率：精度±0.01（SNP分析）
• 杂合性缺失：检测阈值≥20%
• 连锁分析：LOD评分≥3.0

表达分析：

• 差异表达倍数：|log2FC|≥1.0（p值<0.05）
• 内参稳定性：CV≤5%（GB/T27401）
• RNA稳定性：降解率≤10%/h

甲基化检测：

• 甲基化水平：百分比精度±2%（亚硫酸氢盐测序）
• 位点特异性：覆盖深度≥30x
• 非特异性率：≤1%（背景噪声）

微生物鉴定：

• 16SrRNA相似度：≥97%（物种判定）
• 丰度定量：相对偏差±5%
• 多样性指数：Shannon≥3.0

质量控制：

• 批次一致性：RSD≤10%（重复试验）
• 回收率：85%-115%（加标实验）
• 污染监控：阴性对照无信号

遗传变异：

• 突变频率：检测下限0.1%（深度≥100x）
• 拷贝数变异：log2比值±0.3
• 融合基因检测：灵敏度≥90%

环境核酸：

• 降解测试：片段大小≥100bp
• 抑制剂耐受：Ct偏移≤2.0
• 背景清除：信噪比≥10

合成核酸：

• 序列准确性：匹配度≥99.9%
• 杂质残留：≤0.1%（HPLC标准）
• 功能性验证：表达效率≥80%

检测范围

1.临床血液样本：EDTA或肝素抗凝全血，重点检测病毒载量（如HIVRNA）和循环肿瘤DNA突变

2.唾液及口腔拭子：无创采集样本，重点检测口腔微生物组和病原体（如SARS-CoV-2）

3.组织活检样本：福尔马林固定石蜡包埋组织，重点检测基因表达谱和肿瘤标志物

4.环境水体样本：地表水或废水，重点监测微生物污染（如大肠杆菌DNA）和抗生素抗性基因

5.食品及农产品：肉类、谷物或转基因作物，重点鉴定转基因成分和食源性病原体核酸

6.细胞培养物：哺乳动物或细菌细胞，重点分析基因编辑效率和RNA干扰效果

7.法医学样本：毛发、精液或骨骼，重点个体鉴定和STR分型

8.病毒载体产品：基因治疗制剂，重点检测滴度（vg/mL）和残留宿主DNA

9.古生物样本：化石或考古材料，重点测试DNA降解程度和古病原体重建

10.生物制品：疫苗或重组蛋白，重点监控核酸杂质和工艺残留

11.植物组织：叶片或种子，重点检测遗传修饰和病原感染

12.空气气溶胶：过滤采集样本，重点分析空气传播病原体（如流感病毒RNA）

13.粪便样本：肠道微生物组研究，重点定量菌群丰度和多样性

14.合成生物学产品：人工基因电路，重点验证序列保真度和功能性核酸

15.海洋生物样本：浮游生物或珊瑚，重点监测环境DNA和生物多样性

检测方法

国际标准：

• ISO20391-1:2018细胞计数方法-核酸浓度测定
• ISO15189:2022医学实验室-质量和能力要求
• ISO/IEC17025:2017检测和校准实验室能力
• CLSIMM19-A2分子诊断方法验证指南
• ISO13843:2017水质-微生物分子检测方法

国家标准：

• GB/T34796-2017核酸定量检测方法
• GB/T27401-2008实验室质量控制规范
• GB/T19495.3-2004转基因产品检测-核酸提取
• GB/T30988-2014多酚氧化酶活性测定-分子方法
• GB/T35928-2018病原微生物核酸检测通则

方法差异说明：国际标准如ISO15189强调临床验证和风险管理，适用全球实验室；而国家标准如GB/T19495.3更针对特定应用（如农业转基因），且在核酸提取缓冲液配方和样本处理温度上存在细微差异（国际多采用Tris-EDTA，国标偏好醋酸铵体系）

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪：QuantStudio6Flex（检测通道：6色，温度精度±0.1°C）

2.下一代测序仪：NovaSeq6000（通量：6Tb/run，读长：2x150bp）

3.核酸提取工作站：KingFisherFlex（通量：96样本/批次，回收率≥95%）

4.紫外分光光度计：NanoDropOne（检测范围：2-3700ng/μL，波长：260/280nm）

5.电泳成像系统：GelDocXR+（分辨率：6.5百万像素，凝胶类型：琼脂糖/聚丙烯酰胺）

6.高速离心机：Centrifuge5430R（转速：15,000rpm，容量：24x1.5mL）

7.恒温金属浴：ThermoMixerC（温度范围：-10°C至100°C，振荡频率：300-1500rpm）

8.超低温冰箱：JianCeTFreezer（温度：-80°C，容量：700L）

9.生物安全柜：ClassIIA2（气流：0.38m/s，HEPA过滤效率99.99%）

10.高通量移液系统：Echo525（精度：±1.5%，通量：1536孔板）

11.荧光显微镜：BX53（放大倍数：40x-1000x，荧光通道：4色）

12.恒温培养箱：IN260（温度范围：-10°C至70°C，湿度控制：10%-80%）

13.超纯水系统：Milli-QAdvantage（水质：18.2MΩ·cm，产水流速：2L/min）

14.核酸定量仪：Qubit4.0（灵敏度：0.1ng/μL，检测染料：dsDNAHS）

15.真空浓缩仪：SpeedVac（真空度：<1mbar，温度：室温至60°C）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情，因时间等不可抗拒因素会发生变更，请咨询在线工程师.