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酶促反应动力学实验

原创
关键字: 酶促反应动力学实验测试范围,酶促反应动力学实验测试周期,酶促反应动力学实验项目报价
发布时间:2025-06-25 13:38:43
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检测项目

基本动力学参数检测:

  • 米氏常数(Km):值范围0.01-100mM(参照IUBMB指南)
  • 最大反应速率(Vmax):单位μmol/min/mg(参照酶活力测定标准)
  • 催化常数(kcat):s^{-1}(计算要求精度±5%)
酶活性及比活性测定:
  • 酶活力单位:U/mg(定义参照标准方法)
  • 比活性:催化效率≥100min^{-1}mg^{-1}
pH依赖性动力学:
  • 最适pH:值范围3.0-10.0(精度±0.1)
  • pH稳定性:半衰期≥60min(参照缓冲体系标准)
温度依赖性动力学:
  • 最适温度:℃范围20-80(精度±0.5℃)
  • 热失活常数:Kd值测定(单位min^{-1})
抑制剂动力学分析:
  • 抑制剂常数(Ki):μM级(参照可逆抑制剂标准)
  • 抑制类型:竞争性/非竞争性判定
激活剂影响检测:
  • 激活常数(Ka):mM级(精度±2%)
  • 激活效率:倍数变化≥1.5
酶底物特异性测试:
  • 底物选择性:Km比值分析
  • 特异常数:kcat/Km差异≤10%
酶稳定性测试:
  • 储存稳定性:残留活力≥80%(4℃/30天)
  • 操作稳定性:循环使用次数≥5
反应条件优化参数:
  • 底物浓度范围:0.1-10Km
  • 缓冲液离子强度:0.05-0.2M
数据分析方法参数:
  • 线性化拟合:双倒数斜率误差≤5%
  • 非线性回归:R²≥0.99

检测范围

1.蛋白酶类:如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶,重点检测肽键水解反应的Km和Vmax优化

2.氧化还原酶类:如葡萄糖氧化酶、过氧化物酶,侧重氧化还原速率及电子转移效率测试

3.转移酶类:如激酶、转氨酶,检测磷酸基团或氨基转移的催化常数

4.水解酶类:如脂肪酶、淀粉酶,针对酯键或糖苷键水解的底物特异性分析

5.裂合酶类:如碳酸酐酶、醛缩酶,测试脱水或加成反应的动力学参数

6.异构酶类:如磷酸葡萄糖异构酶,检测异构化过程的最适pH和温度

7.荧光标记酶:如荧光素酶,重点量化荧光强度变化的反应初速度

8.固定化酶:如载体结合酶,检测固定化后的Km漂移和稳定性参数

9.酶抑制剂筛选样品:如小分子化合物库,侧重Ki测定和抑制类型鉴定

10.酶激活剂样品:如金属离子制剂,测试激活常数和催化效率提升

检测方法

国际标准:

  • IUBMBEnzymeKinetics:MeasurementandDataAnalysis
  • ISO标准酶活性测定规程
国家标准:
  • GB/T酶促反应动力学试验通用方法
  • GB/T酶抑制剂常数测定标准
国际标准推荐非线性回归拟合,而国家标准常用线性双倒数法处理动力学数据

检测设备

1.紫外可见分光光度计:UV-2600型(波长范围190-1100nm,分辨率±0.1nm)

2.荧光光度计:FL-6500型(激发波长200-800nm,检测限0.01RFU)

3.pH计:PH-100型(精度±0.01pH,温度补偿±0.1℃)

4.恒温水浴槽:WT-200型(温控范围0-100℃,稳定性±0.1℃)

5.酶标仪:EM-9600型(96孔板高通量,吸光度精度±0.005)

6.高效液相色谱仪:HPLC-1200型(流速0.1-10mL/min,检测限1ng)

7.离心机:CF-16型(转速100-15000rpm,容量50mL)

8.精密移液器:MP-10型(体积范围0.1-1000μL,误差≤0.5%)

9.磁力搅拌器:MS-500型(转速50-1500rpm,功率50W)

10.数据采集系统:DAQ-2000型(采样率100Hz,接口USB)

11.恒温摇床:IS-100型(振荡频率0-300rpm,温控±0.5℃)

12.停流装置:SF-50型(混合时间<2ms,检测延迟10μs)

13.温度控制器:TC-300型(PID控制,范围-20-150℃)

14.酶反应器:ER-100型(微流控设计,体积10-100μL)

15.缓冲液制备系统:BP-500型(离子强度调节精度±0.01M)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师.

内容-荣誉资质

其他证书详情(可咨询在线工程师):

荣誉资质 国防经济发展促进会 AAA级信用证书

合作客户(部分)

1、自改制以来和政、企、军多方多次合作,并获得众多好评;

2、始终以"助力科学进步、推动社会发展"作为研究院纲领;

3、坚持科学发展道路,统筹实验建设与技术人才培养共同发展;

4、学习贯彻人大精神,努力发展自身科技实力。

合作客户

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