检测项目
DNA提取与分析:
- 纯度检测:OD260/OD280比值(1.8-2.0)、DNA浓度(≥50ng/μL,参照ISO 21571:2005)
- 完整性检测:凝胶电泳条带清晰度(无拖尾现象)、片段大小(200-1000bp)
PCR扩增检测:- 特异性引物设计:扩增效率(CT值18-30)、引物Tm值(55-65°C)
- 扩增产物分析:预期条带大小(100-500bp)、非特异性扩增控制(阴性对照无信号)
实时荧光PCR:- 定量分析:检测限(≤0.1%转基因含量)、Ct值偏差(±1.5)
- 探针设计:FAM荧光标记效率(信号强度≥1000 RFU)、淬灭剂选择(BHQ1或TAMRA)
电泳分析:- 凝胶电泳:电压设置(100-150V)、运行时间(30-60分钟)
- 条带判读:大小精度(±5bp)、背景干扰控制(无杂带)
序列比对:- 同源性分析:序列匹配度(≥95%)、SNP检测(变异位点≤3)
- 数据库比对:GenBank参考序列(覆盖率≥90%)
蛋白质免疫检测:- Western Blot:蛋白表达水平(灰度值分析)、特异性抗体结合(阳性对照信号)
- ELISA检测:吸光度值(OD450≥0.5)、交叉反应控制(阴性样本OD450≤0.1)
定量分析:- 转基因含量计算:相对定量(%转基因DNA)、绝对定量(拷贝数/μg DNA)
- 误差范围:RSD≤5%、回收率(90-110%)
样品制备:- 基质去除:脂肪去除率(≥95%)、蛋白质降解(SDS处理)
- 均质化处理:颗粒大小(≤100μm)、均匀度(变异系数≤10%)
质量控制:- 内标基因检测:参考基因扩增(如actin)、稳定性(Ct值波动±1)
- 假阴性控制:抑制剂检测(添加外源DNA)、阳性对照设置(转基因标准品)
结果验证:- 重复性测试:批内RSD≤5%、批间RSD≤10%
- 确认试验:二次PCR验证(一致性100%)、测序确认(错误率≤0.1%)
检测范围
1.新鲜牡蛎样本:涵盖活体或冷藏样本,检测重点为DNA降解控制及组织异质性影响。
2.干燥牡蛎粉:包括喷雾干燥或冻干产品,检测重点为水分含量干扰及颗粒均匀度。
3.牡蛎提取物:涉及酶解或溶剂提取物,检测重点为残留试剂干扰及低浓度DNA回收。
4.牡蛎饲料添加剂:覆盖预混料或颗粒饲料,检测重点为基质复杂性及交叉污染风险。
5.牡蛎保健品:包括胶囊或片剂,检测重点为添加剂影响及假阳性控制。
6.牡蛎调味品:涉及酱料或粉末,检测重点为盐分和pH值干扰。
7.牡蛎罐头产品:涵盖密封加工品,检测重点为高温处理DNA损伤及防腐剂影响。
8.牡蛎生物制品:包括酶或肽类产品,检测重点为蛋白质干扰及非特异性结合。
9.牡蛎环境样本:涉及养殖水域残留物,检测重点为背景污染及低丰度检测。
10.牡蛎衍生材料:覆盖壳粉或软骨素,检测重点为无机物干扰及DNA提取效率。
检测方法
国际标准:
- ISO 21571:2005 食品中转基因成分DNA提取方法(采用CTAB法,与国标差异在于缓冲液配方)
- ISO 21569:2005 转基因检测定性PCR方法(使用通用引物,灵敏度高于国标)
- ISO 21570:2005 转基因定量实时PCR方法(探针设计规范,检测限更低)
国家标准:- GB/T 19495.1-2004 转基因产品检测通用要求(样品制备步骤更简化)
- GB/T 19495.3-2004 转基因产品PCR检测方法(扩增程序差异,循环数少5次)
- GB/T 19495.5-2004 转基因产品实时荧光PCR方法(使用SYBR Green,成本较低)
检测设备
1.PCR仪:Thermo Fisher QuantStudio 5(温度精度±0.1°C,升降温速率4°C/s)
2.实时荧光PCR系统:Roche LightCycler 480(检测通道6个,动态范围10^7)
3.电泳系统:Bio-Rad PowerPac Basic(电压范围0-300V,电流0-400mA)
4.凝胶成像仪:Vilber Lourmat Fusion FX(分辨率6.5百万像素,曝光时间0.1-60s)
5.分光光度计:Thermo NanoDrop One(样品量1-2μL,波长范围190-850nm)
6.离心机:Eppendorf 5424 R(转速100-15000rpm,容量24×1.5mL)
7.均质仪:IKA T25 Digital(转速300-25000rpm,处理体积0.5-100mL)
8.恒温混匀仪:Eppendorf ThermoMixer C(温度范围-10-100°C,震荡频率300-1500rpm)
9.酶标仪:BioTek Synergy H1(检测模式荧光/吸光,波长范围200-999nm)
10.核酸提取仪:Qiagen QIAcube(通量1-12样本,提取时间≤30分钟)
11.测序仪:Illumina MiSeq(读长2×300bp,通量25M reads)
12.超低温冰箱:Thermo Scientific Forma 900系列(温度-86°C,容量700L)
13.生物安全柜:ESCO Airstream Class II(风速0.3-0.5m/s,HEPA过滤效率99.99%)
14.天平:Sartorius Cubis II(精度0.0001g,量程0-220g)
15.纯水系统:Merck Milli-Q IQ 7000(电阻率18.2MΩ·cm,流量1-2L/min)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).
CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师.
合作客户(部分)
1、自改制以来和政、企、军多方多次合作,并获得众多好评;
2、始终以"助力科学进步、推动社会发展"作为研究院纲领;
3、坚持科学发展道路,统筹实验建设与技术人才培养共同发展;
4、学习贯彻人大精神,努力发展自身科技实力。