检测项目
胆汁酸合成基因表达:
- CYP7A1基因表达:表达水平(fold change)、Ct值(参照ISO 15189)
- CYP27A1基因表达:表达水平(fold change)
- CYP8B1基因表达:表达水平(fold change)
胆汁酸转运基因表达:- ABCG5基因表达:表达水平(fold change)、检测限(≤0.01)
- ABCG8基因表达:表达水平(fold change)
- ABCB11基因表达:表达水平(fold change)
炎症相关基因表达:- TNF-α基因表达:表达水平(fold change)、参照GB/T 34796
- IL-6基因表达:表达水平(fold change)
- IL-1β基因表达:表达水平(fold change)
氧化应激基因表达:- SOD1基因表达:表达水平(fold change)
- GPX1基因表达:表达水平(fold change)
- CAT基因表达:表达水平(fold change)
细胞凋亡基因表达:- BAX基因表达:表达水平(fold change)
- BCL-2基因表达:表达水平(fold change)
- CASP3基因表达:表达水平(fold change)
代谢通路基因表达:- FXR基因表达:表达水平(fold change)
- LXR基因表达:表达水平(fold change)
- SREBP1C基因表达:表达水平(fold change)
RNA质量检测:- RNA完整性:RIN值(≥7)
- RNA浓度:检测限(≥10ng/μL)
- RNA纯度:A260/A280比值(1.8-2.0)
蛋白质表达检测:- 胆汁酸受体蛋白:表达水平(fold change)
- 转运蛋白表达:表达水平(fold change)
- 炎症因子蛋白:表达水平(fold change)
表观遗传学修饰检测:- DNA甲基化水平:甲基化率(%)
- 组蛋白修饰:修饰程度(参照CLSI EP17)
- 非编码RNA表达:表达水平(fold change)
整合生物标志物分析:- 基因表达谱:差异表达基因数(≥5)
- 通路富集分析:富集分数(P≤0.05)
- 生物标志物组合:相关系数(≥0.8)
检测范围
1. 肝组织样本: 涵盖手术切除或活检肝组织,重点检测肝细胞中胆汁酸合成和转运基因的表达水平,确保RNA完整性及无降解。
2. 胆汁样本: 包括胆囊或胆管抽取胆汁,侧重直接分析胆汁中基因表达标志物及炎症因子,需快速处理以防RNA降解。
3. 血清样本: 涉及血液离心分离血清,检测循环中胆汁酸相关基因表达产物及炎症标志物,重点为低丰度RNA提取。
4. 胆管细胞培养物: 源自体外培养胆管上皮细胞,专注基因表达动态变化及药物响应测试,要求无菌条件控制。
5. 动物模型组织: 包括小鼠或大鼠肝胆组织,重点模拟疾病状态下基因表达差异,需参照伦理标准处理样本。
6. 临床活检样本: 涵盖肝胆疾病患者穿刺组织,侧重病理分级与基因表达关联分析,确保样本代表性。
7. 石蜡包埋组织: 涉及福尔马林固定石蜡块,重点提取高质量RNA用于长期存档样本的回顾性基因表达研究。
8. 冷冻组织样本: 包括液氮速冻保存组织,检测快速冻结下的基因表达稳定性,避免反复冻融。
9. 细胞系样本: 如HepG2或Huh7肝细胞系,专注标准条件下基因表达基线及扰动实验,需细胞传代数控制。
10. 尿液样本: 涉及离心后尿沉渣,检测肝胆疾病相关基因表达排泄物,重点为低浓度RNA富集技术。
检测方法
国际标准:
- ISO 15189:2012 医学实验室质量和能力要求
- CLSI EP17-A2 检测限测试指南
- ISO 20395:2019 分子生物学检测方法验证
- CLSI MM06-A2 定量PCR性能验证
- ISO 17025:2017 检测和校准实验室能力要求
国家标准:- GB/T 37864-2019 生物样本中RNA提取与检测方法
- GB/T 34796-2017 定量PCR检测方法
- GB/T 30988-2014 基因表达分析技术规范
- GB/T 35823-2018 生物样本库质量要求
- GB/T 38504-2020 表观遗传学检测方法
方法差异说明:国际标准如ISO 15189强调全面质控体系包括人员培训和设备校准,而国家标准GB/T 37864针对特定样本类型如肝组织优化RNA提取流程;CLSI EP17注重检测限统计方法,GB/T 34796则规定PCR扩增参数如循环数上限。
检测设备
1. 实时荧光定量PCR仪: ABI QuantStudio 5(检测通道4个,精度±0.1 Ct)
2. 微阵列扫描仪: Agilent SureScan G4900DA(分辨率2μm,波长范围400-1100nm)
3. 流式细胞仪: BD FACSAria III(检测通道18个,流速≤70μL/min)
4. 酶标仪: BioTek Synergy H1(波长范围220-1000nm,检测模式6种)
5. 离心机: Eppendorf 5430R(最大转速15000rpm,容量24×1.5mL)
6. 核酸提取仪: Qiagen QIAcube HT(通量96样本/次,提取效率≥95%)
7. 电泳仪: Bio-Rad PowerPac HC(电压范围10-500V,电流0.1-3.0A)
8. 显微镜: Olympus BX53(放大倍数1000x,分辨率0.2μm)
9. 恒温培养箱: Memmert INCO108(温度范围5-100℃,精度±0.1℃)
10. 超低温冰箱: Thermo Scientific TSX700(温度-86℃,容量700L)
11. 分光光度计: NanoDrop One(检测限1ng/μL,波长范围190-840nm)
12. 生物分析仪: Agilent 4200 TapeStation(RNA完整性数RIN≥7,通量16样本/次)
13. 液氮罐: Taylor-Wharton CX300(容量300L,蒸损率≤0.2L/day)
14. 纯水系统: Milli-Q Integral 5(电阻率18.2MΩ·cm,产水量2L/min)
15. 生物安全柜: Esco Airstream(气流速度0.4m/s,HEPA过滤效率99.99%)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).
CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师.
合作客户(部分)
1、自创办以来和政、企、军多方多次合作,并获得众多好评;
2、始终以"助力科学进步、推动社会发展"作为研究院纲领;
3、坚持科学发展道路,统筹实验建设与技术人才培养共同发展;
4、学习贯彻人大精神,努力发展自身科技实力。