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氨基酸代谢途径研究测试

原创
发布时间:2025-08-13 17:08:14
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检测项目

氨基酸定量分析:

  • 游离氨基酸浓度:总浓度范围(0.5-500μM,参照CLSIEP17-A)、支链氨基酸比例(10-30%)
  • 必需氨基酸检测:赖氨酸偏差值(±0.05μg/mL)、甲硫氨酸回收率(≥95%)
代谢酶活性测试:
  • 转氨酶活性:谷丙转氨酶(ALT活性U/L,Km值0.1-1.0mM)、谷草转氨酶(AST活性U/L)
  • 脱羧酶检测:组氨酸脱羧酶(Vmax≥50nmol/min/mg,参照ISO15193)
代谢中间产物检测:
  • α-酮酸分析:α-酮戊二酸浓度(0.2-200μM)、琥珀酸偏差值(±0.1μg/mL)
  • 胺类化合物:腐胺定量(检测限0.01ng/mL)、精胺回收率(≥90%)
途径通量计算:
  • 尿素循环通量:氨消除率(≥80%)、瓜氨酸转化率(0.1-1.0μmol/min)
  • 三羧酸循环:柠檬酸合成速率(Vmax≥20nmol/min/mg)
氧化应激指标:
  • 自由基检测:超氧阴离子浓度(0.05-5.0μM)、丙二醛(MDA含量nmol/mg)
  • 抗氧化能力:谷胱甘肽(GSH/GSSG比值1.5-3.0,参照ISO21427)
氮平衡分析:
  • 总氮排泄:尿氮浓度(5-50mg/dL)、粪便氮偏差值(±0.2mg/g)
  • 氮利用率:净蛋白保留率(≥60%)
同位素标记追踪:
  • 稳定同位素通量:13C-亮氨酸掺入率(0.1-1.0%/h)、15N-氨追踪效率(≥85%)
  • 标记代谢物:13C-α-酮酸回收率(≥90%)
基因表达分析:
  • 代谢酶基因:GOT1表达量(foldchange≥1.5)、GLUD1偏差值(±0.2)
  • 调控因子:mTOR信号通路活性(磷酸化率≥70%)
蛋白质组学检测:
  • 酶蛋白定量:谷氨酰胺合成酶含量(0.1-10ng/μL)、乙酰化修饰比例(5-20%)
  • 磷酸化状态:AMPK磷酸化水平(检测限0.01pmol)
细胞代谢模型验证:
  • 通量平衡:ATP产生率(≥10nmol/min/cell)、乳酸积累偏差(±0.1mM)
  • 模型拟合度:R²值≥0.95(参照ISO5725)

检测范围

1.血浆样本:涵盖健康及疾病状态血浆,重点检测游离氨基酸谱异常和氧化应激指标,用于代谢综合征诊断

2.尿液样本:包括晨尿及24小时收集尿,侧重代谢废物(如尿素、肌酐)和氮平衡分析,支持肾功能测试

3.组织匀浆:肝、肾组织提取物,核心检测酶活性和中间产物浓度,验证器官特异性代谢途径

4.细胞培养液:涵盖HepG2、Caco-2细胞系上清,重点分析氨基酸摄取率和通量变化,用于药物毒性测试

5.营养补充剂:蛋白粉及氨基酸配方,检测必需氨基酸比例和回收率,确保产品合规性

6.药品制剂:代谢调节药物(如亮氨酸类似物),侧重活性成分浓度和代谢产物偏差,支持药效验证

7.食品基质:乳制品及谷物提取物,重点检测总氨基酸含量和生物利用率,用于营养标签验证

8.微生物培养物:大肠杆菌及酵母发酵液,核心测试氮源利用效率和通量,优化生物工艺

9.生物标志物试剂:商用检测试剂盒,验证标准曲线线性(R²≥0.99)和交叉反应率

10.临床样本库:冷冻保存血清及组织,长期监测代谢指标稳定性和批次一致性

检测方法

国际标准:

  • ISO15193:2009酶活性测定方法(要求样品预处理低温离心)
  • CLSIEP05-A3精密度验证(设定重复性CV≤5%)
  • ISO21427:2006氧化应激指标检测(使用荧光法,检测限0.01μM)
  • ISO5725:1994准确度测试(要求加标回收率85-115%)
国家标准:
  • GB/T5009.124-2016食品氨基酸测定(采用柱前衍生法,与国际HPLC差异在衍生剂选择)
  • GB/T37869-2019生物样本代谢物检测(规定冷冻保存温度-80°C,而国际标准允许-70°C)
  • GB/T35807-2018酶动力学参数计算(使用Lineweaver-Burk法,国际多用Michaelis-Menten直接拟合)
  • GB/T27404-2008实验室质量控制(要求每日校准,国际标准为每周)

检测设备

1.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(检测限0.1ng/mL,流速范围0.1-5mL/min)

2.三重四极杆质谱仪:ThermoScientificTSQAltis(质量精度±0.1Da,扫描范围50-2000m/z)

3.酶标仪:BioTekSynergyH1(吸光度范围0-4OD,分辨率1nm)

4.超速离心机:BeckmanCoulterOptimaXE(最大转速100,000rpm,温度控制±1°C)

5.气相色谱仪:ShimadzuGC-2030(检测限0.01ppm,柱温范围40-400°C)

6.实时荧光PCR仪:RocheLightCycler480(扩增效率90-110%,温控精度±0.1°C)

7.氨基酸分析仪:HitachiL-8900(分离时间≤30min,进样量10μL)

8.紫外可见分光光度计:PerkinElmerLambda35(波长范围190-1100nm,带宽1nm)

9.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone6(真空度≤0.1mBar,温度-50°C)

10.恒温培养箱:MemmertIN110(温度范围5-60°C,均匀性±0.5°C)

11.同位素质谱仪:ElementarIsoPrime100(同位素比精度±0.1‰,检测限0.01atom%)

12.细胞代谢分析仪:SeahorseXFe24(耗氧率检测范围0-500pmol/min,pH精度±0.05)

13.电化学工作站:CHI760E(电位范围±10V,电流分辨率1pA)

14.全自动样品处理器:HamiltonMicrolabSTAR(进样精度±0.5μL,通量96孔/小时)

15.生物反应器:SartoriusBiostatB(体积范围0.1-10L,DO控制±2%)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师.

合作客户(部分)

1、自创办以来和政、企、军多方多次合作,并获得众多好评;

2、始终以"助力科学进步、推动社会发展"作为研究院纲领;

3、坚持科学发展道路,统筹实验建设与技术人才培养共同发展;

4、学习贯彻人大精神,努力发展自身科技实力。

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