柑桔苗黄病毒检测

检测项目

1.病毒核酸序列检测：采用RT-PCR技术对CP基因（外壳蛋白基因）进行特异性扩增，扩增产物长度控制在500-800bp区间
2.病毒外壳蛋白含量测定：通过ELISA法测定OD450值，阳性阈值设定≥0.3（阴性对照≤0.15）
3.血清学反应测试：采用DAS-ELISA双抗体夹心法，抗体效价要求≥1:1000
4.寄主植物病理观察：叶片黄化指数分级（0-4级），维管束褐变面积≥30%判定为阳性
5.病毒粒子电镜观测：负染法处理样本，观察直径28-32nm的二十面体病毒颗粒

检测范围

1.嫁接用柑桔苗木（包括接穗与砧木接口部位）
2.组培脱毒苗的继代培养材料
3.进口种质资源的检疫样本
4.田间疑似病株的叶片与韧皮部组织
5.育苗基质的残留根系样本

检测方法

1.GB/T35342-2017《柑桔黄龙病检疫鉴定方法》规定的实时荧光定量PCR法
2.ISO16140-3:2021《分子生物学方法验证规程》中的引物特异性验证流程
3.ASTME3066-16《植物病原体免疫测定标准指南》ELISA操作规范
4.GB15569-2009《农业植物调运检疫规程》抽样与处理要求
5.OEPP/EPPOPM7/119(1)国际植保组织认证的电子显微镜观测方案

检测设备

1.ABI7500实时荧光定量PCR仪：用于病毒核酸绝对定量分析
2.ThermoFisherQuantStudio5数字PCR系统：实现单拷贝级别灵敏度检测
3.Bio-RadiMark酶标仪：完成ELISA反应的吸光度测定
4.HitachiHT7800透射电镜：病毒粒子形态学观察（加速电压80kV）
5.QiagenQIAcube全自动核酸提取仪：处理木质化组织样本
6.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机：核酸纯化分离（最大转速30,000g）
7.LeicaCM1950冰冻切片机：制备30μm厚度的维管束横切面样本
8.Agilent4200TapeStation系统：RNA完整性指数（RIN≥7.0）测试
9.MemmertIPP110培养箱：维持28℃恒温条件下病原增殖培养
10.OlympusBX53荧光显微镜：观察胼胝质沉积特征（激发波长488nm）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情，因时间等不可抗拒因素会发生变更，请咨询在线工程师.