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抗生素抗性测试

原创
发布时间:2025-07-14 15:43:19
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检测项目

微生物敏感性测试:

  • 最小抑菌浓度测定:MIC值范围0.03-256μg/mL(参照CLSIM07)
  • 抗菌谱分析:抑菌圈直径≥20mm(判定耐药阈值)
  • 时间杀菌曲线:杀菌率≥90%(24小时内)
耐药基因检测:
  • PCR扩增:靶基因检出限≥10copies/μL(如mecA、blaKPC)
  • qRT-PCR定量:Ct值≤35(相对表达量变化)
  • 基因测序:覆盖率≥99%(突变位点检测)
表型确认试验:
  • ESBL检测:协同抑制试验阳性(抑菌圈增加≥5mm)
  • 碳青霉烯酶表型:改良Hodge试验阳性(生长指数≥0.5)
  • 膜孔蛋白缺失:渗透性测试阳性(渗透率变化≥20%)
酶活性测定:
  • β-内酰胺酶检测:硝噻吩纸片法阳性(变色时间≤60秒)
  • 氨基糖苷修饰酶:酶活性单位≥50U/mg(抑制率≥70%)
  • 拓扑异构酶突变:超螺旋DNA解旋率≥80%(参照ISO20776-2)
分子生物学分析:
  • 全基因组测序:覆盖度≥30x(SNP检测精度)
  • MLST分型:等位基因匹配率≥95%(7个位点分析)
  • 质粒图谱:电泳迁移率≥1.5cm(大小范围2-200kb)
流行病学研究:
  • 抗性谱聚类分析:相似度系数≥0.8(基于欧氏距离)
  • 传播动力学模型:传播速率R0≥1.5(参数拟合)
  • 菌株溯源:单核苷酸多态性差异≤5个(参照PulseNet)
质量控制测试:
  • 参考菌株验证:ATCC菌株符合率≥98%(生长控制)
  • 试剂稳定性:有效期≥12个月(效能偏差±5%)
  • 环境监测:培养皿污染率≤1%(空气沉降试验)
新药筛选:
  • 体外药效测试:IC50值≤10μg/mL(半数抑制作用)
  • 组合疗法测试:协同指数FIC≤0.5(抗生素联用效果)
  • 耐药逆转实验:抗性降低率≥50%(抑制剂添加)
生物膜抗性:
  • 生物膜形成力:OD值≥0.5(96孔板测定)
  • 穿透性测试:抗生素渗透深度≥100μm(共聚焦显微镜)
  • 代谢活性:ATP浓度≥1nM(生物发光法)
环境样本分析:
  • 土壤微生物抗性:抗性基因丰度≥10^4copies/g(qPCR定量)
  • 水体耐药检测:MIC值升高≥4倍(暴露试验)
  • 抗生素残留影响:最低影响浓度LOEC≤1μg/L(生态毒理)

检测范围

1.临床分离菌株:涵盖金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等致病菌,重点检测革兰氏阳性与阴性菌的广谱耐药性

2.环境微生物样本:土壤、水体中分离的耐药菌,侧重环境抗性基因传播与生态风险

3.食品源微生物:肉类、乳制品中的污染菌,检测抗生素残留诱导的抗性表型

4.兽医样本分离株:动物源性细菌如沙门氏菌,重点监测多重耐药与跨物种传播

5.真菌病原体:念珠菌、曲霉菌等,检测抗真菌药物如唑类的敏感性阈值

6.生物膜样本:医疗器械表面形成的生物膜,测试抗生素穿透性与持久抗性

7.抗生素新药候选:合成或天然化合物,侧重体外药效与抗性逆转潜力

8.耐药菌株库:保存的参考菌株,用于质量控制与标准方法验证

9.人体微生物组:肠道、皮肤菌群,分析共生菌抗性基因携带率

10.工业发酵样本:生产过程中的微生物,检测抗性变异与工艺稳定性

检测方法

国际标准:

  • CLSIM07-A11肉汤微量稀释法(MIC测定,使用96孔板)
  • EUCASTv13.0纸片扩散法(抑菌圈判读,断点差异说明:EUCAST断点基于临床数据,CLSI基于实验室基准)
  • ISO20776-1:2019琼脂稀释法(固体培养基测试,方法差异说明:相比肉汤法,琼脂法更稳定但耗时较长)
  • ISO11731:2017水质微生物抗性检测(环境样本适用性差异说明:ISO标准针对低生物量样本优化)
国家标准:
  • GB/T4789.28-2023食品微生物药敏试验(纸片法应用,方法差异说明:GB标准简化版,与国际标准断点对齐)
  • GB/T14926.64-2021动物源细菌耐药性检测(兽医样本,方法差异说明:GB采用多重PCR,而国际标准多用表型法)
  • GB/T18204.9-2021公共场所微生物抗性测试(环境监测,方法差异说明:GB标准增加采样规范,国际标准侧重实验室分析)
  • GB/T21803-2020抗生素残留检测(残留影响测试,方法差异说明:GB使用HPLC-MS,而国际多用生物测定法)

检测设备

1.自动化药敏系统:VITEK2Compact(检测抗生素种类≥20种,精度±5%)

2.PCR扩增仪:AppliedBiosystems7500(温度范围4-99°C,升降温速率6°C/s)

3.微生物培养箱:ThermoScientificHeratherm(温度控制35±0.5°C,湿度≥90%)

4.微量稀释板读取器:BioTekSynergyH1(波长范围200-999nm,分辨率0.001OD)

5.凝胶成像系统:Bio-RadChemiDoc(像素≥5MP,灵敏度0.1pgDNA)

6.质谱仪:WatersXevoTQ-S(质量精度±0.1Da,扫描速度10Hz)

7.共聚焦显微镜:LeicaTCSSP8(分辨率≤0.2μm,Z轴深度≥100μm)

8.流式细胞仪:BDFACSCantoII(检测速率≥10,000细胞/秒,荧光通道≥8)

9.生物反应器:SartoriusBIOSTATQplus(容积范围0.1-10L,搅拌速度10-2000rpm)

10.高通量测序仪:IlluminaNovaSeq6000(通量≥6Tb/run,读取长度150bp)

11.酶标仪:PerkinElmerEnVision(检测模式≥6种,动态范围0-4OD)

12.离心机:EppendorfCentrifuge5425(转速≤21,000rpm,温控范围-10°C至40°C)

13.超低温冰箱:ThermoScientificForma900系列(温度-86°C±1°C,容积≥500L)

14.生物安全柜:EscoAirstream(气流速度≥0.5m/s,HEPA过滤效率99.999%)

15.电泳系统:Bio-RadPowerPacBasic(电压范围10-300V,电流0-400mA)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师.

合作客户(部分)

1、自创办以来和政、企、军多方多次合作,并获得众多好评;

2、始终以"助力科学进步、推动社会发展"作为研究院纲领;

3、坚持科学发展道路,统筹实验建设与技术人才培养共同发展;

4、学习贯彻人大精神,努力发展自身科技实力。

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