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最小抑菌浓度测试

原创
发布时间:2025-08-11 15:10:57
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检测项目

微生物准备:

  • 菌种选择:ATCC标准菌株(如大肠杆菌ATCC25922)、真菌孢子浓度(10^5CFU/mL)
  • 培养复苏:35±2°C孵育18-24小时(参照CLSIM07)
  • 悬浮液制备:0.5麦氏浊度标准(吸光度0.08-0.1)
药物稀释:
  • 梯度系列:二倍稀释法(浓度范围0.008-256μg/mL)
  • 溶剂控制:无菌水或DMSO(浓度≤1%)
  • 稀释精度:误差±5%(ISO20776)
接种技术:
  • 微量加样:接种量50μL(精度±2μL)
  • 混匀方法:涡旋振荡(转速2000rpm)
  • 无菌操作:生物安全柜内执行(洁净度ClassII)
培养条件:
  • 温度控制:35±1°C(细菌)、25-28°C(真菌)
  • 时间设置:16-20小时(快速法)、24-48小时(标准法)
  • 湿度调节:相对湿度≥85%(防止蒸发)
结果判读:
  • 抑菌终点:最低无生长浓度(MIC值)
  • 生长对照:阳性对照浊度≥0.5麦氏单位
  • 耐药性判定:折点标准(如CLSIM100)
质量控制:
  • 内控菌株:金黄色葡萄球菌ATCC29213(MIC范围0.25-1μg/mL)
  • 精密度测试:重复性RSD≤10%
  • 偏差监测:与参考值差异±1稀释度
耐药性分析:
  • 耐药机制:ESBL检测(头孢噻肟MIC≥2μg/mL)
  • 交叉耐药:多药组合测试(梯度变化)
  • 报告输出:S/I/R分类(敏感/中介/耐药)
方法验证:
  • 线性范围:r≥0.98(浓度-响应曲线)
  • 检测限:最低可测浓度0.008μg/mL
  • 重现性:批间CV≤15%
数据处理:
  • 软件分析:MIC值自动计算(算法符合EUCAST)
  • 统计报告:95%置信区间
  • 数据存储:电子记录(审计追踪)
报告生成:
  • 结果格式:MIC值(μg/mL)、折点参照
  • 合规性:符合GLP规范
  • 文档控制:版本管理和电子签名

检测范围

1.抗生素制剂:包括β-内酰胺类、大环内酯类等,重点检测革兰氏阳性菌和阴性菌的MIC值及耐药性演变

2.消毒剂产品:含氯、季铵盐类消毒剂,侧重杀菌效果测试和最低有效浓度确定

3.抗菌涂料:银离子或有机抗菌涂层,检测对常见环境菌(如铜绿假单胞菌)的持久抑菌性

4.医疗设备材料:导管、植入物表面抗菌处理,重点测试生物膜抑制浓度和安全性

5.食品防腐剂:苯甲酸、山梨酸钾等,检测对食源性致病菌(如沙门氏菌)的MIC及稳定性

6.化妆品抗菌成分:三氯生、茶树油等,侧重皮肤常驻菌(如痤疮丙酸杆菌)的抑制浓度和兼容性

7.水处理剂:臭氧、氯制剂,检测水生微生物(如军团菌)的灭活浓度和残留影响

8.纺织品抗菌处理:纳米银纤维或季铵盐整理剂,重点测试洗涤后抑菌率衰减和MIC变化

9.动物饲料添加剂:杆菌肽、黄霉素等,检测畜禽病原菌(如大肠杆菌)的MIC及耐药风险

10.环境消毒剂:过氧乙酸、醛类消毒剂,侧重空气和表面微生物(如霉菌孢子)的抑制浓度测试

检测方法

国际标准:

  • CLSIM07-A11肉汤微量稀释法抗菌药物敏感性试验
  • ISO20776-1:2019抗菌药物敏感性试验的参考方法
  • EUCASTv13.0欧洲抗菌药物敏感性试验标准
国家标准:
  • ChP2020附录抗菌药物效价测定
  • GB/T38496-2020消毒剂抗菌效果检测方法
  • YY/T0688.1-2020医疗器械抗菌性能评价
方法差异说明:CLSI与ChP在接种量上不同(CLSI要求50μL,ChP为100μL);ISO和GB在培养温度控制上存在偏差(ISO允许±0.5°C,GB为±1°C);EUCAST与CLSI的折点判定标准差异(如头孢菌素类耐药阈值)。

检测设备

1.微量稀释板:ThermoScientificNunc(孔数96孔,容积200μL)

2.自动稀释器:HamiltonMicrolabSTAR(精度±1μL,流速0.1-1000μL/min)

3.恒温培养箱:MemmertINCO108(温度范围20-60°C,稳定性±0.1°C)

4.分光光度计:ShimadzuUV-1900i(波长范围190-1100nm,分辨率0.1nm)

5.生物安全柜:EscoAirstream(洁净度ClassII,风速0.3-0.5m/s)

6.自动读板机:BioTekSynergyH1(检测模式吸光度/荧光,精度±0.002OD)

7.涡旋振荡器:IKAMS3(转速500-3000rpm,定时0-60min)

8.离心机:Eppendorf5430R(最大转速15000rpm,容量24×1.5mL)

9.恒温摇床:INFORSHTMinitron(振荡频率50-300rpm,温度控制±0.5°C)

10.pH计:MettlerToledoSevenExcellence(测量范围0-14pH,精度±0.01)

11.电子天平:SartoriusQuintix(量程0.001g-220g,精度±0.1mg)

12.超净工作台:CleanBenchPCR-18(HEPA过滤,洁净度ISO5)

13.恒温水浴:JulaboF12(温度范围-10-150°C,均匀性±0.01°C)

14.显微镜:OlympusCX43(放大倍数40-1000×,分辨率0.2μm)

15.数据记录仪:GrantSquirrelSQ2020(通道数8,采样率1Hz)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师.

合作客户(部分)

1、自创办以来和政、企、军多方多次合作,并获得众多好评;

2、始终以"助力科学进步、推动社会发展"作为研究院纲领;

3、坚持科学发展道路,统筹实验建设与技术人才培养共同发展;

4、学习贯彻人大精神,努力发展自身科技实力。

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